高效液相色谱法测定刺楸总皂苷中刺楸皂苷A的含量

作者:代写论文来源：星论文网发布时间：2009-07-15 14:35:49

[摘要] 本文采用大孔树脂法制备了一定量的刺楸总皂苷，并采用高效液相色谱法，以乙腈-0.05%磷酸溶液(55:45)为流动相，203nm为检测波长，以活性成分刺楸皂苷A为指标对三批刺楸总皂苷进行了含量测定，按外标法测得刺楸皂苷A的平均含量为9.66mg/g，为刺楸的进一步开发提供了实验数据。

ABSTRACT：the author obtained total saponins through macroporous adsorbing resin. An HPLC method was established for determination of kalopanaxsaponin A in total saponins. The determination was achieved on a stainless steel Kromasil C₁₈ column (4.6 mm × 250 mm, 5µm) at 25℃, and carried out with acetonitrile and 0.05% phosphoric acid (55:45) at a flow rate of 1.0mL/min. Detection wave was set at 203nm. Three batches of total saponins obtained from Kalopanax septemlobus (Thunb.) Koidz. were determined and the average content of kalopanaxsaponin A was 9.66mg/g.

关键词：刺楸；总皂苷；皂苷A；含量测定

Key words: Kalopanax septemlobus (Thunb.) Koidz.; total saponins; kalopanaxsaponin A; content determination

[中国分类号] R927.2

刺楸生长于山坡杂木林中，分布于全国各省区，以根、根皮或树皮入药^[1]，刺楸为五加科植物Kalopanax septemlobus (Thunb.) Koidz.，1977年版《中国药典》(一部)中以“川桐皮”收载^[2]。具有祛风、除湿、通络、杀虫之功效，临床用于治疗各种风湿痹证、腰膝疼痛等。通过研究发现，刺楸总皂苷具有抗炎活性，其中刺楸皂苷A是其中的主要活性成分，具有抗肿瘤、抗菌、抗炎等活性。为进一步开发刺楸药用资源，本章采用大孔树脂法制备了刺楸总皂苷，并选择刺楸皂苷A作为含量测定的指标，采用高效液相色谱法对刺楸总皂苷中的刺楸皂苷A进行了含量测定研究，效果满意，现报道如下。

1仪器与材料

SSI/HPLC 系统，EZchrom Elite色谱工作站，sartorius BT 25S精密电子天平，721B 型分光光度计，D101、AB-8、D4020大孔树脂(天津南开大学化工厂)，乙腈、甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。刺楸皂苷A为自制对照品(结构经¹H-NMR及¹³C-NMR鉴定)，纯度经HPLC面积归一化法测定大于98.5%。

2 刺楸总皂苷的制备

2.1总皂苷的含量测定

2.1.1标准曲线的绘制

精密称取刺楸皂苷A对照品8.0mg，用甲醇溶解并定容至5mL，分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，置25mL具塞试管中，然后加入甲醇使终体积为1.0mL。另取1.0mL甲醇作为空白对照。在各管中依次加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL，高氯酸0.8mL，摇匀后置60℃水浴中加热15min，取出后迅速用流水冷却至室温，再分别加入5mL冰醋酸，摇匀，于203nm处测定吸光度。以浓度(C)为横坐标、吸光度(A)为纵坐标进行线性回归，得回归方程A= 0.0042C-0.0356(r=0.9988)，表明刺楸皂苷A在45.71～228.55μg/mL范围内浓度与吸光度呈良好的线性关系。实验结果见表1，标准曲线见图1。

表1 线性范围测定结果