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ST段抬高型心肌梗死患者内皮微粒与心肌损伤的关系

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作者:代写论文  来源:星论文网  发布时间:2012-09-21 09:33:00

 中华急诊医学杂志2012年7月第21卷第7期Chin J Emerg Med,July 2012,Vol.21,No.7
  P701-705
  【摘要】目的 观察ST段抬高型心肌梗死患者外周血内皮微粒(CD31+/CD42b-)的水平,探讨CD31+/CD42b-内皮微粒与传统心肌损伤指标的相关性。方法 随机选取2010年1月至2010年12月经冠状动脉造影证实的冠心病患者44例,其中稳定性心绞痛(SAP)患者22例,ST段抬高型心肌梗死患者22例;同期门诊体检健康的对照组22例进行前瞻性观察研究。应用流式细胞仪检测入院时外周血CD31+/CD42b-内皮微粒的水平,应用生化分析仪检测肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB),高敏C反应蛋白(hs-CRP)等;用化学发光仪检测肌钙蛋白I(cTnI)。STEMI组每4 h检测心肌损伤标志物直至入院后48 h。分析入院时血CD31+/CD42b-内皮微粒与心肌损伤标志物峰值的关系。结果 STEMI患者外周血CD31+/CD42b-内皮微粒的水平显著高于SAP组、正常对照组 (P<0.01),且SAP组与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。STEMI患者心肌损伤标志物(CK,CK-MB, cTnI 和hs-CRP)与循环血CD31+/CD42b- 的Spearman相关性分析结果分别为:r=0.489, P=0.021;r=0.501, P=0.018;r=0.491, P=0.02;r=0.612,P=0.002。结论 外周血CD31+/CD42b-内皮微粒的水平有可能成为预测STEMI患者心肌损伤的指标。
  【关键词】心肌梗死;内皮微粒;心肌损伤
  The relationship between endothelial microparticles in patients with ST- elevated myocardial infarction and myocardial injury QIN Guang-ming, JIN Ya-ping, YANG Xu-feng, JIANG Zhen-ni. Department of Clinical Laboratory Medicine, Second Affiliated Hospital Zhejiang University College of Medcine, Hangzhou 310009, China
  【Abstract】Objective To observe the level of circulating CD31+/CD42b- endothelial microparticles in patients with ST- elevated myocardial infarction(STEMI), and discuss the correlation between CD31+/CD42b- and traditional myocardial injury index. Methods A total of 22 healthy subjects and 44 patients with angiographically confirmed coronary atherosclerotic lesions collected from January 2010 to December 2010 were studied prospectively. The patients were divided into SAP (stable angina pectoris, Canadian Cardiovascular Society, CCS Ⅱ to Ⅲ) group (n=22) and STEMI group (n=22). The level of circulating CD31+/CD42b-endothelial microparticles was detected by flow cytometric device after admission; creatine kinase (CK) and its isoenzymes (CK-MB) were detected by using biochemical analyzer; C-reactive protein was determined by a highly sensitive latex-enhanced turbidimetric immunoassay with a low detection limit of 0.25 mg/dl (IMMAGE, Beckman Coulter; Reagent from Orion Diagn Co. Ltd., Vantaa, Finland). Cardiac troponin I was measured by chemiluminescence immunoassay (ACCESS2 from Beckman Coulter). In 22 STEMI patients, blood sample was taken not only after admission but subsequently at 4-hour intervals during the first 48 hours. Peak levels of myocardial enzymes after injury (creatine kinase, CK; creatine kinase MB isoenzyme, CK-MB; c troponins I, cTnI) and high sensitive C reactive protein (hs-CRP) values were determined. The correlation between circulating level of CD31+/CD42b- and peak levels of myocardial biomarkers after injury were analyzed.Results The endothelial micro-particles were significantly higher in STEMI patients than those in either SAP group or normal group (P< 0.01), whereas there was no difference between the latter two groups. In STEMI patients studied in these cross sectional study, circulating CD31+/CD42b-microparticles were positively correlated with peak level of myocardial biomarkers after injury. Moreover, the correlations between myocardial biomarkers after injury (CK, CK-MB, cTnI and hs-CRP) and circulating CD31+/CD42b- microparticles were r=0.489, P=0.021;r=0.501, P=0.018;r=0.491, P=0.02;r=0.612, P=0.002. Conclusions The level of circulating blood CD31+/CD42b- endothelial micro-particle was expected to become a predictive marker in STEMI.   【Key words】Myocardial infarction;Endothelial microparticles;Myocardial injury
  急性ST段抬高型心肌梗死(ST-elevation myocardial infarction, STEMI)的病理生理发展主要是由于内皮损伤和修复之间动态平衡被破坏造成的[1-2]。完整的血管内皮在维持血管稳态和防止血栓形成方面发挥着重要作用。内皮细胞在冠状动脉粥样硬化形成和急性心肌梗死的发生发展中起决定性作用 [2-3]。因此,评估内皮损伤程度对急性心血管事件的发生具有重要价值。内皮微粒(endothelial microparticles, EMPs)是内皮细胞激活或凋亡时释放出来具有相同功能的微小有膜的囊泡,大小30~100 nm,带有原细胞的细胞膜组分和胞浆组分[4]。本研究以循环内皮微粒作为血管内皮损伤的标记物,观察急性ST段抬高型心肌梗死患者血管内皮细胞损伤程度,探讨内皮微粒与心肌损伤指标的相关性。
  1 资料与方法
  1.1 一般资料
  选择2010年1月至2010年12月浙江大学医学院附属第二医院经冠状动脉造影证实的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者44例,其中稳定性心绞痛组(stable angina pectoris, SAP,Canadian Cardiovascular Society加拿大心血管协会,CCS评分 Ⅱ到 Ⅲ级)22例[男性17名,年龄(67.1±7.3)岁], ST段抬高的心肌梗死组(ST elevation myocardial infarction , STEMI)22例[男性19名,年龄(61.5±10.3)岁]。参照2007年ESC/ACCF/AHA/WHF心肌梗死诊断标准[5],排除合并有肺部疾患、严重肝肾功能不全,肿瘤以及肌肉疾病、造血系统疾病、严重感染未控制、其他部位梗死,如脑梗死、肺梗死等,以及 24 h内出现过心源性休克和(或)死亡的患者。同期门诊体检正常健康人22例,性别和年龄与患者相仿[男性15名,平均年龄(65.1±10.9)岁],没有临床急性或慢性疾病症状,没有接受任何药物治疗。所有入选者均征得患者或家属同意并签署知情同意书。
  1.2 方法
  为避免冠状动脉造影及相关介入治疗干扰,所有患者均在入院时进行外周血采集。使用21-G针头采集受试者肘静脉全血,用柠檬酸钠抗凝管收集2管(Vacuum Becton-Dickinson, Franklin Lakes, N.J., USA)。保存一只试管用于血清学检测,另一试管用160 g离心10 min,准备贫血小板血浆。肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)用免疫学化学发光法(ACCESS2 from Beckman Coulter,美国)检测,参考范围为0.06 ng/ml,批间差异CV<10%。肌酸激酶(creatine kinase, CK)、肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase MB isoenzyme, CK-MB)和高敏CRP(high sensitive C reactive protein,hs-CRP)用全自动生化分析仪(Olympus 5400,Beckman Coulter)检测。STEMI组入院后每隔4 h抽血测定血心肌损伤指标直至入院后48 h,取峰值进行研究。CK采用酶速率法检测(澳斯邦,山东),批间差异CV<3.3%;CK-MB采用选择性免疫抑制酶偶联动力学检测(澳斯邦,山东),批间差异CV<4.0%;hs-CRP采用乳胶凝集比浊法检测(执诚生物,上海),批间差异CV<5.6%。
  EMPs检测[6]:贫血小板血浆从4 ml全血中离心分离出来,取其中50 μl血浆加入anti-CD31-PE(5 μl) 和 anti-CD42b-FITC(5 μl) 抗体,以及相应的同型免疫球蛋白(试剂为Beckman Coulter原装试剂)。暗室常温轻柔震荡孵育30 min,样本检测采用EPICS流式细胞仪(Beckman Coulter, Calif, USA),由一名独立的检验人员盲法操作。测试前在样本中加入50 μl由制造商提供的10 μm 已知浓度的流式计数标准微粒,用于计算CD31+/CD42b- MPs的绝对浓度。如图1A,B所示。CD31+/CD42b- EMPs数值用EMPs颗粒数/μl表示。
  1.3 统计学方法
  正态分布数值以均数±标准差(x±s)表示,数据分析使用SPSS 13.0统计软件,方差不齐的数据经对数转换后统计。两组均数间比较采用独立样本t检验;多组间比较采用ANOVA方法比较;两两比较采用LSD检验;相关性采用Spearman相关分析; 以P<0.05为差异具有统计学意义。
  2 结果
  2.1 心肌损伤的标志物的比较
  44例患者和22名健康人的心肌损伤的标志物的比较结果见表1。经LSD两两比较,STEMI患者的心肌损伤标志物(CK、CK-MB、cTnI和hs-CRP)水平显著高于SAP组和健康对照组(P<0.01);SAP组与健康对照组比较差异无统计学意义;三组间的年龄差异无统计学意义(P>0.05)。
  2.2 外周血CD31+/CD42b- EMPs的水平
  健康对照组、STEMI组和SAP组外周血CD31+/CD42b- EMPs的水平。见图2。STEMI患者的CD31+/CD42b- EMPs水平(7095.68±1784.08) 个/μl显著高于SAP组(1971.32±945.11)个/μl和健康对照组(1616.91±576.57)个/μl(F=140.73,P<0.01)。而在SAP组和健康对照组的水平差异无统计学意义(t=1.50,P>0.05)。   2.3 相关性分析
  STEMI患者外周血CD31+/CD42b- EMPs水平与心肌损伤指标的相关性。见图3。
  STEMI患者心肌损伤标志物(CK,CK-MB, cTnI 和hs-CRP)和外周血CD31+/CD42b- EMPs的Spearman相关系数和P分别是:r=0.489, P=0.021;r=0.501, P=0.018;r=0.491, P=0.02;
  r=0.612, P=0.002。提示外周血CD31+/CD42b-EMPs的水平有可能成为预测STEMI患者心肌损伤的指标。
  3 讨论
  EMPs是内皮细胞激活或凋亡时释放出来微小的带有原细胞的细胞膜组分的囊泡[4,6-7],如CD31、CD51等。而血小板激活或凋亡时也释放出微小囊泡,如CD31、CD42a或CD42b等。Mallat等[8] 发现CD31+ EMP的水平升高与急性冠脉综合征(ACS)具有相关性。CD31+ EMPs在ACS患者中显著升高,而在SAP患者中并不出现;然而,CD51+ EMPs在两种患者中都会升高。CD31既来源于内皮细胞,又来源于血小板;而CD42b仅来源于血小板。因此,本研究应用流式细胞术,通过双色染色,选择CD31+/CD42b- EMPs作为STEMI的标志物。这样既能排除来自血小板的干扰,又能增加来自内皮细胞的特异性。
  研究表明外周血EMPs可反映内皮细胞损伤和全身血管重构的一种标志物,作为内皮损伤和功能紊乱的替代性标记已被国内外学者认可[3-4,6-7]。STEMI患者外周血CD31+/CD42b- EMPs水平显著高于SAP组和正常组(P<0.01)。而SAP组和正常组的其水平差异无统计学意义(P>0.05)。其可能原因有:(1)内皮功能障碍。它的本质是内皮损伤和修复之间动态平衡的破坏。研究表明内皮损伤是动脉粥样硬化的第一步。内皮数量减少及功能损伤可能导致冠状动脉自身修复能力降低与缺血心肌的新生血管减少,导致血管内膜完整性破坏,容易血栓形成[9]。(2)冠状动脉粥样硬化斑块中的内皮细胞凋亡增加或激活增加,削弱了内皮的的正常抗炎、抗凝、抗血栓作用,内皮细胞剥脱导致内皮下胶原暴露而促使局部血栓形成导致ACS发生。
  急性ST段抬高型心肌梗死诊断和治疗指南[1]强调了肌钙蛋白诊断急性心肌梗死的价值,指出肌酸激酶同工酶仍然是特异性诊断指标。笔者的研究证实STEMI患者的外周血CD31+/CD42b- EMPs水平与血浆CK、CK-MB 、cTnI 和hs-CRP峰值具有较好的相关性(相关系数和P分别是r= 0.489, P=0.021;r=0.501, P=0.018;r=0.491, P=0.02; r=0.612, P=0.002)。本研究提示,外周血CD31+/CD42b- EMPs水平有可能成为预测STEMI患者内皮损伤的指标。
  血清hs-CRP水平与循环CD31+/CD42b- EMPs水平呈正相关。提示炎症反应加重内皮损伤和凋亡,导致循环CD31+/CD42b- EMPs水平升高。有研究指出,hs-CRP削弱血管的内皮依赖性舒张反应,抑制内皮细胞一氧化氮释放,损伤内皮功能[10]。又有报道称,hs-CRP对STEMI患者心脏终点事件有预测价值[11]。因此,hs-CRP水平和循环CD31+/CD42b- EMPs水平升高可能可以反映STEMI患者内皮损伤的严重程度。
  综上所述,外周血CD31+/CD42b- EMPs水平在STEMI患者中明显增高,并与CK、CK-MB、cTnI和hs-CRP峰值具有相关性。然而,当前的研究设计没能对心肌损伤程度和EMPs水平的因果关系作出结论,这归咎于观察样本数量有限和无法排除选择性误差,因此,这个试验获得的结果可能不能代表整个人群。本研究成果的证实需要大样本多中心的研究。
  参考文献
  [1]高润霖. 遵循新指南进一步改善急性ST段抬高型心肌梗死的临床实践[J]. 中华心血管病杂志, 2010, 38 (8) :673-674.
  [2] Endemann DH, Schiffrin EL. Endothelial dysfunction[J]. J Am Soc Nephrol, 2004,15(8): 1983-1992.
  [3] Osto E, Coppolino G, Volpe M, et al. Restoring the dysfunctional endothelium [J]. Curr Pharm Des,2007,13(1) :1053-1068.
  [4] Bobik A. Circulating microparticles markers or participants in carotid artery remodeling?[J]. J Hypertens,2010,28(4):673-675.
  [5] Thygesen K, Alpert JS, White HD. Universal definition of myocardial infaarction [J]. Circulation,2007,116(22):2634-2653.   [6]Boulanger CM, Amabile N, Tedgui A. Circulating microparticles: a potential prognostic marker for atherosclerotic vascular disease[J]. Hypertension,2006,48(2):180-186.
  [7] Wang JM, Yang Z, Xu MG, et al. Berberine-induced decline in circulating CD31+/CD42- microparticles is associated with improvement of endothelial function in humans[J]. Eur J Pharmacol,2009,614(1):77-83.
  [8] Mallat Z, Benamer H, Hugel B, et al. Elevated levels of shed membrane microparticles with procoagulant potential in the peripheral circulating blood of patients with acute coronary symptoms[J]. Circulation, 2000,101(8):841-843.
  [9] Siasos G, Tousoulis D, Vlachopoulos C, et al. Short-term treatment with L-arginine prevents the smoking-induced impairment of endothelial function and vascular elastic properties in young individuals[J]. Int J Cardiol,2008,126(3):394-399.
  [10]Venma S, Kuliszewski MA,Li SH,et al. C-reactive protein attenuates endothelial progenitor cell survival, differentiation, and function:further evidence of a mechanistic link between C-reactive protein and cardiovascular disease [J]. Circulation,2004,109(17):2058-2067.
  [11]赵根来,王岚峰,李竹琴.超敏C反应蛋白对急性ST段抬高心肌梗死患者心脏终点事件的预测价值[J].中华急诊医学杂志,2010,19(4):392-396.
  (收稿日期:2012-03-24)
  (本文编辑:沈惠云)
  DOI:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2012.07.006
  基金项目:浙江省卫生厅资助项目(2008B096);浙江省中医药管理局资助项目( 2008CB038 )
  作者单位:310009 杭州,浙江大学医学院附属第二医院检验科(秦光明、金亚平、杨旭峰),心内科(蒋珍妮)


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