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香排草药材质量标准研究

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作者:原作原创  来源:网络转载  发布时间:2016-12-22 13:11:00

 香排草又名排草、排草香、箱排草,为唇形科植物香排草Anisochilus carnosus(L.) Wall.干燥带老茎的根茎及根,产于广东、广西等地,具有化湿辟浊、利水消肿的功效,主治暑湿吐泻、水肿、小便不利[1],目前以中医临床处方用药为主,亦有以香排草为原料的成方制剂如十香止痛丸、避瘟散等[2]。香排草收载于《中国药典》2005年版一部附录,但无相关质量控制指标,因此为了提高香排草的质量控制,保证中医临床用药的安全有效,实现对药材及其成方制剂质量的有效监控,本实验结合药典规定对10批不同产地香排草样品的药材性状、显微特征、薄层鉴别、浸出物及各项检查项进行研究[3-6],旨在完善香排草的质量控制方法,为香排草药材标准的提高提供参考。 
  1仪器与试药 
  1.1仪器 
  奥林巴斯BX51光学显微镜(日本Olympus公司,型号:BX51),暗箱式紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂,型号:ZF-20D),电子分析天平(梅特勒-托利多集团,型号:MS204S/01),调速多用振荡器(江苏荣华仪器制造有限公司,型号:HY-4),电热恒温干燥箱(上海浦东跃欣科学仪器厂,型号:202A-0),数字控温电热套(天津市泰斯特仪器有限公司,型号:SKM),箱式高温电阻炉(中国科学院精密机械研究所,型号:SG-XL1700),高速万能粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司,型号:FW100)。 
  1.2试剂 
  硅胶G预制板(烟台化学工业研究所),水为纯化水,环己烷(天津欧博凯化工有限公司)、乙酸乙酯(天津欧博凯化工有限公司)、三氯甲烷(天津光复精细化工研究所),石油醚(天津市科密欧化学试剂有限公司)、乙醚(天津市科密欧化学试剂有限公司)分析纯。 
  1.3对照药材及样品 
  香排草对照药材及10批样品均购于安国、亳州、北京等地,产自广西、广东,经河北省食品药品检定研究院段吉平主任中药师鉴定为唇形科植物香排草Anisochilus carnosus(L.) Wall.干燥带老茎的根茎及根。 
  2方法与结果 
  2.1药材性状 
  根据对收集样品的实际观察,并参考《中华本草》等文献报告[7-11],描绘做出叙述。本品根头部残茎呈扁圆柱形或方柱形,长20~40 cm,直径0.7~2 cm,表面紫褐色或灰棕色,茎节明显,有交互对生的残存分支,质坚硬,不易折断,断面中空。根茎短粗,节处着生多数根,长5~20 cm,灰褐色,并有毛茸状须根,质柔韧,不易折断,断面淡黄棕色。气香特异,味淡。 
  2.2显微特征 
  参考徐国钧主编的《中药材粉末显微鉴定》等[12-13]对香排草的粉末特征进行描述。本品粉末棕褐色,韧皮纤维单个散在,梭形,长60~250 μm,直径25~40 μm,壁厚,孔沟明显。石细胞类方形或类长方形。具缘纹孔导管多见,直径36~89 μm。淀粉粒众多,单粒类球形,复粒2~3分粒组成(图1)。

2.3薄层色谱鉴别 
  2.3.1供试品溶液的制备 取本品粉末0.5 g,加乙醚10 ml,密塞,振摇10 min,滤过,滤液蒸干,残渣加丙酮1 ml使溶解,作为供试品溶液。 
  2.3.2对照药材溶液的制备 取香排草对照药材0.5 g,同法制成对照药材溶液。 
  2.3.3薄层鉴别实验条件的选择 在香排草的薄层鉴别中,分别对提取方法、薄层板、展开剂,点样量进行考察。 
  在提取方法的选择上:分别对不同溶剂[甲醇、丙酮、三氯甲烷、石油醚(30~60℃)、乙醚]和不同提取方法(超声、回流、振摇)进行考察,经比较认为,提取溶剂为乙醚的斑点更清晰,振摇提取方法更简便。 
  在薄层板的选择上:分别选用硅胶G薄层板(烟台化学工业研究所,批号20150409)(图2)、硅胶H薄层板(烟台化学工业研究所,批号20150310)(图3),硅胶GF254薄层板(烟台化学工业研究所,批号110525)展开。以硅胶G为吸附剂的薄层板,斑点清晰,分离效果较好;以硅胶H为吸附剂的薄层板斑点分散,且出现拖尾,不清晰;以硅胶GF254为吸附剂的薄层板看不见斑点,因此选择以硅胶G为吸附剂的薄层板。 
  在“2.3”检测条件下还分别对不同温湿度条件(常温、常湿、高温高湿、低温)进行了考察,结果表明本薄层实验的耐用性很好。 
  2.3.4薄层的展开 参照《中国药典》2015年版四部(通则0502)薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各2 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯(10.0∶2.0∶1.5)为展开剂,展开,取出,晾干。 
  2.3.5检视 置紫外光灯(365 nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的荧光斑点。 
  2.3.6样品检识 按上述条件对10批香排草样品进行薄层色谱鉴别,图谱详见图6。由图可见斑点分离效果好且斑点清晰。 
  T:22℃ RH:43% 
  2.4检查及浸出物 
  2.4.1测定方法 ①水分:取香排草药材粉末约2 g,精密称定,按照《中国药典》2015年版四部(通则0832水分测定法第二法:烘干法)进行测定,结果见表1。②总灰分:取香排草药材粉末约2 g,精密称定,按照《中国药典》2015年版四部(通则2302总灰分测定法)进行测定,结果见表1。③酸不溶性灰分:取总灰分项下所得的灰分,按照《中国药典》2015年版四部(通则2302酸不溶灰分测定法)进行测定,结果见表1。④浸出物:取香排草药材粉末约2 g,精密称定,按照《中国药典》2015年版四部(通则2302总灰分测定法)进行测定,采用热浸法以70%乙醇为溶剂,测定醇溶性浸出物,结果见表1。 
  2.4.2测定结果 10批香排草样品的水分在6.0%~9.5%之间,总灰分在0.8%~10.0%之间,酸不溶性灰分在0.3%~2.1%之间,浸出物在4.3%~10.7%之间。 
  3讨论 
  3.1水分的测定 
  香排草为芳香性药材,是否含挥发性成分尚不明确,因此本实验分别采用甲苯法和烘干法对水分测定进行了考察,结果表明烘干法和甲苯法测量水分数据接近,因此选择以烘干法测定香排草水分。 
  3.2浸出物的测定 
  香排草药材的有效成分目前没有相关文献的记载,不能建立起有效成分的含量测定方法,因此选择建立了浸出物项作为香排草药材质量控制之一。实验考察了不同浸出方法(冷浸法和热浸法)和不同提取溶剂(水、乙醇、70%乙醇、稀乙醇),结果表明,在醇溶性浸出物中以热浸法的70%乙醇为提取溶剂的含量较高;在水溶性浸出物中以冷浸法的水为提取溶剂的浸出物的含量较高,但样品处理过程中过滤困难,因此选择醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定,以70%乙醇作溶剂,依法测定。 
  3.3香排草的易混淆品种 
  在收集样品过程中发现,另有报春花科植物细梗香草Lysimachia capillipes Hemsl.的干燥全草在内蒙、贵州等地作香排草使用[14-15],两者在性状上不同,且与《中国药典》附录中收载品种不同,因此在实际工作中应注意鉴别,防止误用和混淆。 
  目前香排草药材的相关研究很少,这对于药材质量的控制具有一定影响,本实验对性状、显微特征、薄层定性鉴别及水分、总灰分、酸不溶灰分、浸出物进行了测定,该方法操作简单,结果重复性好,以期能够科学地控制香排草药材质量。 
  [参考文献] 
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  [2]国家药典委员会.中国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社,2005. 
  [3]王硕,袁经权,周小雷,等.瑶药地钻(蔓性千斤拔)药材质量标准研究[J].中成药,2011,33(10):1767-1770. 
  [4]石俊英,于昊峰,张会敏,等.不同产地黄芩药材中黄芩多糖、浸出物含量的研究[J].山东中医药大学学报,2006,30(2):144-147. 
  [5]周刚,王停,何艳萍.中药新药研发中药材研究需关注的问题[J].中国中药杂志,2014,39(16):3192-3195. 
  [6]王伟,孙爱萍,金欣,等.薄层色谱梯度展开法鉴别牡丹皮和徐长卿配方颗粒[J].安徽中医学院学报,2008,27(5):43-45. 
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  [10]上海市食品药品监督管理局.上海市中药饮片炮制规范[M].上海:上海科学技术出版社,2008:136. 
  [11]金世元.中药材传统经验鉴别[M].北京:中国中医药出版社,2010:1-152. 
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  [13]费曜,钟国跃,刘翔,等.常用藏语松蒂(篦齿虎耳草)的显微鉴别研究[J].中国中药杂志,2013,38(6):902-908. 
  [14]内蒙古自治区卫生厅.内蒙古中药材标准[S].1988:97. 
  [15]贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准[M].贵阳:贵州科技出版社,2003:283. 


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